Lors de la manipulation de micro-organismes, il est important d'utiliser correctement la technique aseptique - à la fois pour empêcher vos micro-organismes d'être contaminés par des forces extérieures, ainsi que pour vous protéger et protéger les personnes qui vous entourent.
Pas
Étape 1. Protégez-vous
Attachez les cheveux longs et portez une blouse de laboratoire et des lunettes de protection.
Étape 2. Lavez-vous les mains et votre espace de travail
Lavez-vous les mains avec de l'eau et du savon et vaporisez le banc d'éthanol à 70%.
Étape 3. Disposez tout votre équipement
Assurez-vous que tout est prêt avant de commencer.
Étape 4. Allumez le bec Bunsen aussi haut que possible
Vous en aurez besoin pour stériliser votre équipement, et le courant d'air ascendant empêche les contaminants extérieurs d'atterrir sur votre culture.
Tournez le collier pour que le flux d'air soit complètement ouvert
Étape 5. Stérilisez la boucle d'inoculation
Tenez-le à un angle d'environ 45° vers le bas et déplacez-le lentement à travers la flamme pour qu'il devienne rouge-blanc chaud.
- Il est plus facile de tenir la boucle entre votre pouce et votre index et de la soutenir avec votre majeur.
- La partie la plus chaude de la flamme se trouve juste à l'extrémité du cône de feu bleu intérieur.
Étape 6. Utilisez votre autre main pour saisir votre culture d'origine
- S'il s'agit d'une assiette, tenez-la et ouvrez le couvercle juste assez pour faire entrer la boucle à l'intérieur.
- S'il s'agit d'un tube avec un couvercle, utilisez le petit doigt de la main avec laquelle vous tenez la boucle d'inoculation pour retirer le couvercle, puis faites glisser rapidement l'ouverture du tube à travers la flamme du bec Bunsen deux fois. C'est ce qu'on appelle la flamme et tue tout ce qui veut entrer dans le tube, et crée un courant de convection qui force l'air hors du tube afin que rien ne puisse l'obtenir. Continuez à tenir le couvercle avec votre petit doigt pour l'étape suivante.
Étape 7. Inoculer
Touchez la boucle d'inoculation à une colonie que vous souhaitez ramasser. Si vous inoculez à partir d'un bouillon liquide, plongez l'anse d'inoculation dans le tube et secouez l'anse pour vous assurer d'avoir suffisamment de bactéries.
Étape 8. Fermez la culture d'origine
S'il s'agit d'une assiette, fermez simplement le couvercle et remettez-le en place. S'il s'agit d'un tube, faites glisser l'ouverture à travers la flamme du bec Bunsen deux fois, puis remettez le couvercle en place.
Étape 9. Ouvrez la nouvelle plaque
Comme auparavant, utilisez votre main libre pour ouvrir le couvercle juste assez large pour faire passer la boucle
Étape 10. Plaquez les bactéries
Passez légèrement l'anse d'inoculation sur la surface en veillant à ne pas pénétrer dans la gélose.
Un motif de stries commun est la méthode des quadrants
Étape 11. Fermez la plaque
Étape 12. Stérilisez la boucle d'inoculation
Comme avant, maintenez-le à un angle de 45° vers le bas et déplacez-le lentement à travers la flamme pour qu'il devienne rouge-blanc chaud.
Des astuces
- En général, les gants ne sont pas nécessaires. Toutes les étapes ci-dessus servent à vous protéger et à protéger vos bactéries, de sorte que le risque de contamination est très faible. Les gants peuvent causer de vilaines brûlures si vous les touchez accidentellement avec la boucle d'inoculation chaude.
- Gardez à l'esprit que vous travaillez avec le feu. Ce n'est pas grave, assurez-vous simplement de savoir quoi faire si vous vous brûlez; mettez l'expérience en pause, rincez la brûlure à l'eau et, si nécessaire, prévenez votre superviseur.
- Si vous effectuez plusieurs passages en utilisant une technique aseptique, il n'est pas nécessaire d'éteindre complètement le bec Bunsen entre les passages - il suffit de le baisser jusqu'à la flamme de la veilleuse et de l'éteindre complètement lorsque vous avez complètement terminé.
